当前位置:首页 > 金环蛇 >

金环蛇抗菌肽 金环蛇抗菌肽功效

时间:2014-10-06 来源:毒蛇网 作者:蛇迷 点击:0

   金环蛇(Bungarus fasciatus)属于眼镜蛇科(Elapinae)环蛇属(Bungarus),是一种具有前沟牙的毒蛇,广泛分布于我国广东、广西、福建、江西、海南及云南南部。
 
   在本论文中,我们对金环蛇体内cathelicidins家族抗菌肽cathelicidin-BF进行了一系列研究。
 
   通过凝胶过滤、阳离子交换和反相高压液相三步从金环蛇蛇毒冻干粉中分离纯化得到金环蛇cathelicidins家族抗菌肽,命名为cathelicidin-BF。Edman降解法测定其氨基酸序列为KFFRKLKKSVKKRAKEFFKKPRVIGVSIPF,由30个氨基酸残基组成,ESI-MS测得其分子量为3637.5 Da。


金环蛇抗菌肽 金环蛇抗菌肽功效

金环蛇抗菌肽 金环蛇抗菌肽功效
 
   构建了金环蛇毒腺cDNA文库,从中克隆得到了编码cathelicidin-BF前体的cDNA序列。该cDNA序列长度为750 bp,由此推断出的cathelicidin-BF前体由191个氨基酸残基组成,包括信号肽区、保守的cathelin区和成熟肽区三部分。用RT-PCR的方法对cathelicidin-BF的组织表达情况进行了研究,结果表明cathelicidin-BF在金环蛇胃、气管、皮肤、肌肉、心脏、肾脏、肺、脑、小肠、脾脏、肝脏、卵巢、毒腺中均有表达,但各组织表达量存在差异。进化分析表明,金环蛇cathelicidin-BF与鸭嘴兽CATH-3在系统进化树中独立成簇,表明金环蛇与鸭嘴兽有着一定的亲缘关系,这为鸭嘴兽在动物进化中分类地位的确定提供了参考资料。

金环蛇抗菌肽 金环蛇抗菌肽功效
 
   对cathelicidin-BF可能具有的各种生物学活性进行了研究。Cathelicidin-BF具有广谱的抗微生物活性,对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌均有活性,其中包括大量临床分离耐药菌株。Cathelicidin-BF对革兰氏阴性细菌的活性要强于革兰氏阳性细菌,此外对白色念珠菌、毕赤酵母和一些腐生性真菌也具有活性。Cathelicidin-BF的抗氧化活性、溶血活性、凝集素活性、丝氨酸蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂活性、细胞毒性、抗肿瘤活性均不明显。Cathelicidin-BF具有很强的肥大细胞脱颗粒活性。以上结果表明cathelicidin-BF在金环蛇抵御外界病原微生物侵袭的先天免疫反应中可能发挥了重要作用。
 
   利用多种实验方法对cathelicidin-BF的结构和抗菌机理进行了研究。CD和NMR的实验结果表明,在亲水环境中,cathelicidin-BF为无规卷曲的构象;在疏水或模拟细菌细胞质膜的环境中,cathelicidin-BF的N-末端区域具有典型的两亲性α-螺旋构象。杀菌动力学实验结果表明,cathelicidin-BF杀菌作用极其迅速,在浓度大于1×MIC时,在1 min内即可杀死所有细菌,且其杀菌作用是致死性的。扫描电镜结果表明,经过cathelicidin-BF处理的细菌细胞形状发生明显改变,细胞膨胀变形,表面出现大量囊泡状结构。大量细菌细胞破裂溶解,内容物外泄。综合以上结果我们推测:cathelicidin-BF在亲水的环境中为无规卷曲的结构,当通过静电相互作用吸附到细菌细胞质膜上后,由于环境疏水性的增加其N-端转变为两亲性的α-螺旋构象。Cathelicidin-BF的疏水侧插入到细菌细胞质膜内部,亲水侧暴露于细菌细胞质膜表面。随着结合到细菌细胞质膜上的cathelicidin-BF分子不断增加,细菌细胞质膜内陷,最终在细菌细胞质膜上形成孔洞。细菌细胞内容物大量外流,最终导致细菌细胞的死亡。
 
   通过体外和体内多个实验对cathelicidin-BF进行了初步的药理学和药效学研究。Cathelicidin-BF在血清中稳定性较差,容易被血清中各种蛋白酶降解。一定浓度的盐离子能够增强cathelicidin-BF的抗菌活性。动物模型实验表明,cathelicidin-BF对多种细菌引起的小鼠皮肤感染具有很好的治疗效果。Cathelicidin-BF本身所具有的特点及动物模型实验中表现出的极佳的治疗效果使其成为外用抗菌药物开发的优良模板。
 
  抗菌肽具有不易导致微生物耐药、杀菌时间快、不诱发微生物产生内毒素并可以中和内毒素从而不导致脓毒症的产生等优点。赖仞课题组围绕抗菌肽的识别、发掘以及开发利用做了大量的工作,并建立中国抗菌肽分子资源库。最近,该课题组发现金环蛇来源的抗菌肽对痤疮丙酸杆菌具有显著的抗菌活性。他们利用小鼠构建了痤疮动物模型,研究了金环蛇来源的抗菌肽的体内抗痤疮效果。结果表明,该抗菌肽具有良好的体内痤疮治疗作用,通过抑制发炎因子的分泌和超氧阴离子的产生从而抑制痤疮丙酸杆菌诱导的小鼠肉芽肿性炎。
 
   声明:本站是提供个人知识管理的网络存储空间,所有内容均由用户发布,不代表本站观点。如发现有害或侵权内容,请与我们联系,。 上一页     下一页

   温馨提示:保护野生动物,杜绝野味,人人有责,它们不属于餐桌!
  • 下载app
     扫描二维码下载APP
  • 微信关注
     扫描二维码关注微信
  • 相关文章
    广而告之

    广而告之


  • 毒蛇网:皖ICP备13012650号
  • 网站安全